使用法: | Monkeypoxのウイルスのコレクションおよび検出 | 温度: | -20±5 ℃ |
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安定性: | 24か月 | リサイクル: | 使い捨て可能 |
サンプル: | 全血、血清および損害の浸出物のサンプル | 器械: | ABI7500、ABI7300、LightCycler480、生物ラドCFX96、SLAN-96SおよびQuantStudio。 |
ハイライト: | 蛍光性PCRの核酸の検出のキット,セリウムの核酸の検出のキット,蛍光性PCRの核酸テスト キット |
Monkeypoxのウイルスの核酸の検出のキット(蛍光性PCR方法)
[指定]
24tests/kit、48tests/kit、96tests/kit
[意図されていた使用]
このキットが診断を要求している疑われた感染させた患者および他の患者の全血、血清または損害の浸出物のサンプルから得られるMonkeypoxウイルスDNAの質的な検出を達成するのに使用されている。
[主義]
このキットは拡大ターゲット地域、設計特定のプライマーおよび異なった蛍光調査のラベルとしてMonkeypoxのウイルスの核酸の片の比較的節約された地域を選ぶのに実時間蛍光PCRの技術を使用しサンプルがMonkeypoxウイルスDNAを含んでいるかどうか検出するのにRT-PCRの技術を使用する。
[部品]
指定 | 部品 | パッケージ | 原料 |
24tests/kit | MPV PCRの試薬A | 408μL×1管 | 特定のプライマー、調査、tris塩化水素酸の緩衝、等。 |
MPV PCRの試薬B | 72μL×1管 | ホット スタートのTaqの酵素、ウラシルN GLYCOSYLASE、等。 | |
MPVの肯定的な制御 | 400 μL×1管 | ターゲット遺伝子を含んでいるDNA順序 | |
MPVの否定的な制御 | 400 μL×1管 | NaCl | |
48tests/kit | MPV PCRの試薬A | 816μL×1管 | 特定のプライマー、調査、tris塩化水素酸の緩衝、等。 |
MPV PCRの試薬B | 144μL×1管 | ホット スタートのTaqの酵素、ウラシルN GLYCOSYLASE、等。 | |
MPVの肯定的な制御 | 400 μL×1管 | ターゲット遺伝子を含んでいるDNA順序 | |
MPVの否定的な制御 | 400 μL×1管 | NaCl | |
96tests/kit | MPV PCRの試薬A | 816μL×2管 | 特定のプライマー、調査、tris塩化水素酸の緩衝、等。 |
MPV PCRの試薬B | 144μL×d管 | ホット スタートのTaqの酵素、ウラシルN GLYCOSYLASE、等。 | |
MPVの肯定的な制御 | 400のμL×2管 | ターゲット遺伝子を含んでいるDNA順序 | |
MPVの否定的な制御 | 400のμL×2管 | NaCl |
注:
検出のための異なったバッチからの部品を混合してはいけない。
核酸の抽出の試薬:Deweiによって製造された核酸の抽出の試薬を推薦しなさい。
肯定的な制御を使用するとき、核酸の抽出必要性の核酸の抽出は否定的な制御を使用していつ要求されない。
[貯蔵および安定性]
キットは12か月間-20±5 ℃で貯えることができる。
7日間のための4 ℃の一時的に店。
繰り返された凍り、分解は7回を超過するべきではない試薬を開ける7回を超過するべきではない。
低温の交通機関を保つドライ アイスは4日を超過するべきではない。
[器械]
ABI7500、ABI7300、LightCycler480、生物ラドCFX96、SLAN-96SおよびQuantStudioのような実時間PCRの器械。
[見本抽出し、扱う]
[議定書]
ウイルスDNAの抽出のキットの対応する条件そしてプロシージャに従って200μLに核酸の抽出のための液体のサンプル、肯定的な制御および否定的な制御を、取ることを推薦する。
PCRの管を反作用タンクに入れ、対応する順序で各反作用の名前をよく置きなさい。
室温でキットからの最高殊勲選手PCRの試薬AおよびB、雪解け、振動および組合せの使用の前の8,000のrpmの遠心分離機を数秒間取りなさい。
PCRの反作用の管のNのPCを取りなさい(テストされるべきN =サンプルの数+否定的な制御+肯定的な制御)
最高殊勲選手の単一の拡大システムの構成は次の通りある:
MPV PCRの試薬A | 17μL |
MPV PCRの試薬B | 3μL |
拡大システム | 20μL |
次に部品を完全に混合した後、管の壁のすべての液体が管の底に遠心分離機にかけられるように遠心分離機は少しの間PCRの管に、そして拡大システムの20 µlを分配する。
それぞれの5µlを8,000のrpmで上のPCRの管に、および最高殊勲選手肯定的な制御、堅く管の帽子および遠心分離機テストされるべきサンプルの処理された否定的な制御、核酸数秒間、そして拡大の検出区域への移動加えなさい。
PCRの管を反作用タンクに入れ、対応する順序で各反作用の名前をよく置きなさい。
検出の蛍光性の設定:(1) Monkeypoxのウイルス(FAM);(2)内部制御(CY5)。
次の循環の議定書を動かしなさい:ABI7500、生物ラドCFX96、SLAN-96SおよびQuantStudioは、よりよい操作のための器械の利用者マニュアルを示す:
ステップ | 温度 | 時間 | 周期 | |
1 | 前変性 | 95 ℃ | 2min | 1 |
2 | 変性 | 95 ℃ | 10 s | 45 |
アニーリング、延長、蛍光性の獲得 | 60 ℃ | 30 s |
反作用の後で、結果は自動的に救われる。」分析するために分析するために「かちりと鳴らせば器械は自動的に結果のコラムの各サンプルのCtの価値を解釈する。否定的で、肯定的な制御結果は次に合致する
「5.品質管理」。
否定的な制御:FAMチャネルのCtかCt>40無し、正常な拡大のカーブが付いているCY5チャネルのCt≤40。
肯定的な制御:正常な拡大のカーブが付いているFAMチャネルのCt≤35、正常な拡大のカーブが付いているCY5チャネルのCt≤40。
結果は規準の上のすべての会えば有効である。さもなければ、結果は無効である。
[結果の解釈]
次の結果は可能である:
FAMチャネルのCtの価値 | CY5チャネルのCtの価値 | 解釈 | |
1# | CtかCt>40無し | ≤40 | Monkeypoxのウイルスの陰性 |
2# | ≤40 | 結果 | Monkeypoxのウイルスの陽性 |
3# | 40~45 | ≤40 | 再検査;それがそれでも40~45なら、1#としてレポート |
4# | CtかCt>40無し | CtかCt>40無し | 無効 |
注:無効なら結果は起こるために、サンプル再度集められ、テストされる必要がある。
[検出の限定]
このキットの検出の結果は臨床参照のためだけであり、臨床診断および処置のために証拠として直接使用されるべきではない。患者の臨床管理は彼らの徴候、身体歴および露出の歴史を伴って考慮されるべきである。
検出の結果は標本コレクション、貯蔵および交通機関を含む操作によって、影響されることができる。偽の否定的な結果は操作に間違いがあれば行われるかもしれない。標本の処置の間のクロス汚染は偽陽性の結果をもたらすかもしれない。
[性能指定]
検出の限定:500枚のコピー/mL。
精密:の中バッチのCtの価値の変化(CV、%)の係数は/間batchprecisionの≤5%である。
正確さ:否定的で/肯定的な参照の一致率:100%。
特定性:ヒト ゲノムおよび次の病原体との交差反応無し:天然痘ウイルス、ヒツジのポックスウイルス、vacciniaのウイルス、鶏のポックスウイルス、肝炎のウイルス、肝炎のウイルス、HIVウイルス、エンテロウイルス。
[注意]
すべての液体の試薬は使用の前の室温で十分に溶け、混合され、使用の前の8,000のrpmで数秒間遠心分離機にかけられるべきである。
使用の後で汚染を防ぐために、包装および不用な液体は医学の無駄として均一に扱われなければならない。